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Búsquedas previas al 2023, Núm. 3. En la sección Volúmenes 30 - 41 (2012 - 2023).
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PorAbimael Rubio Sosa, Misael Martínez Bolaños, Juan Florencio Gómez Leyva, Salvador Lozano Trejo*, Ernesto Castañeda Hidalgo, Gustavo Omar Diaz Zorrilla
Recibido: 30/8/2024 – Publicado: 26/3/2025 – DOI: https://doi.org/10.18781/R.MEX.FIT.2307-1
Resumen Antecedentes/Objetivo. El objetivo del estudio fue aislar y caracterizar cepas nativas de Trichoderma provenientes de cultivos orgánicos de café arábica (Coffea arabica) en el estado de Oaxaca, así como evaluar su potencial de biocontrol in vitro contra Colletotrichum spp., agente causal de la antracnosis.
Materiales y Métodos. Se colectaron muestras de suelo y material vegetativo de parcelas de plantas de café, a partir de las cuales se aislaron cepas de hongos correspondientes al género Trichoderma y Colletotrichum. Se realizó la caracterización macroscópica, microscópica y se evaluó la tasa de crecimiento de cada uno de los aislamientos. Finalmente se realizó la caracterización molecular mediante secuenciación de la región ITS de RNAr. Para evaluar el potencial de biocontrol se hicieron pruebas de antagonismo entre las cepas de los dos géneros.
Resultados. Se identificaron siete especies diferentes: T. harzianum, T. pleuroticola, T. sulphureum, T. tomentosum, T. koningii, T. spirale y T. lentiforme. Estos últimos fueron los más abundantes. De ellos, se seleccionó y evaluó a T. lentiforme en su capacidad de inhibición in vitro contra tres especies de Colletotrichum. Se observó que es capaz de inhibir entre 20 y 80% el crecimiento del hongo.
Conclusión. Se destaca el potencial de Trichoderma como biocontrolador sobre Colletotrichum actuando de diferentes maneras ante este fitopatógeno. Esto, aporta al conocimiento sobre la diversidad de Trichoderma nativos de la región cafetalera del estado de Oaxaca. Además, esta comprensión más profunda, contribuye a enriquecer el conocimiento y a elegir dichas especies para futuros estudios en el biocontrol de fitopatógenos, con el fin de promover prácticas agrícolas sostenibles.
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Figura 1. Caracterización macroscópica de 12 aislamientos de Trichoderma en PDA.
Figura 2. Caracterización macroscópica de tres aislamientos de Colletotrichum en PDA.
Figura 3. Árbol filogenético. A) Productos de amplificación por PCR de la región ITS del ADNr con los oligonucleotidos universales ITS1 e ITS4 de aproximadamente 620 pb. B) Relación filogenética de 12 aislamientos de Trichoderma inferido por análisis de secuencias de ADNr (ITS1, 58S y ITS2). Los números en los nodos representan el porcentaje del bootstrapping con 1,000 repeticiones.
Figura 4. Dendrograma de relación filogenética de 10 aislamientos de Colletotrichum.
Figura 5. Confrontación dual entre cepas de Trichoderma spp. (T13, T14 y T15) y cepas de Colletotrichum spp. (Z1, 108 y 112). Números debajo de los aislamientos representa el PICR (porcentaje de inhibición de crecimiento radial).
Cuadro 1. Caracterización y tasa de crecimiento de los diferentes aislamientos de Trichoderma spp.
PorTabita Queren Pérez Reyes, Santos Gerardo Leyva Mir, Mario Pérez Grajales*, María Teresa Martínez Damián, Rogelio Castro Brindis
Recibido: 30/8/2024 – Publicado: 08/3/2025 – DOI: https://doi.org/10.18781/R.MEX.FIT.2408-5
Resumen Antecedentes/Objetivo. Phytophthora capsici ocasiona pérdidas hasta de 100 % en Capsicum pubescens y no existen variedades comerciales resistentes. Una alternativa viable y sustentable es emplear el portainjerto CM-334 (Capsicum annuum) resistente universal a Phytophthora capsici.
Materiales y Métodos. Se estudió el comportamiento de la biomasa radical del CM-334 al injertarse los híbridos ‘Maruca’, ‘Jhos’ y ‘Dali’ de chile manzano; la resistencia del injerto a P. capsici en suelo infestado y su rendimiento (híbrido ‘Dali’), así como la biomasa radical del CM-334 con aplicaciones de auxinas y T. harzianum.
Resultados. El CM-334 como portainjerto presentó 50, 53 y 75 % de menor volumen de raíz, peso fresco y seco, comparado con los híbridos no injertados. Con el portainjerto CM 334 no hubo incidencia de P. capsici y el rendimiento disminuyó 2 % e incluso con T. harzianum solo o combinado con 1200 ppm de AIB incrementó 8 %. El híbrido ‘Dali’ injertado presentó 32, 50, 50 y 76 % de menor longitud radical, volumen, peso fresco y seco, respectivamente, comparado con el híbrido sin injertar, por lo que se sugieren aplicaciones de 1.25 kg ha-1 de T. harzianum y 1200 ppm de AIB cada 20 días para mejorar la biomasa radical.
Conclusión. El injerto de chile manzano en CM-334 es una alternativa de control viable y sustentable para disminuir la incidencia de P. capsici, ya que ninguna planta injertada mostró síntomas de marchitez, como las no injertadas, y el rendimiento fue igual en el primer ciclo de producción, con la ventaja de que las plantas injertadas producen más ciclos (4 años) mientras que las no injertadas mueren durante el primer ciclo por el oomicete.
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Cuadro 1. Volumen, peso fresco y peso seco de raíces de plantas de chile manzano de los híbridos ‘Maruca’, ‘Jhos’ y ‘Dali’ injertadas en CM-334 vs plantas no injertadas cultivadas en Chapingo, México. Ciclo 2017-2019.
Cuadro 2. Medias de número y peso de frutos por planta y rendimiento por hectárea de chile manzano de plantas injertadas sobre CM-334 vs no injertadas, con y sin aplicación de AIB y T. harzianum cultivadas en Chapingo, México. Ciclo 2020 y 2021.
Cuadro 3. Biomasa de raíces de plantas de chile manzano no injertadas e injertadas sobre el CM-334, con y sin aplicación de AIB y T. harzianum en Chapingo, México. Ciclo 2020-2022.
Figura 1. Escala arbitraria para evaluación de incidencia y severidad causada por P. capsici en plantas del híbrido ‘Dali’ de Chile manzano (Capsicum pubescens) cultivado en macetas con suelo infestado de P. capsici. Chapingo, México de 2020 a 2021.
Figura 2. Raíz del híbrido de chile manzano sin injertar vs injertado en CM-334 cultivados en hidroponía e invernadero en Chapingo, México de 2017 a 2019. A) Maruca, B) Maruca injertado, C) Jhos, D) Jhos injertado, E) ‘Dali’, F) ‘Dali’ injertado.
Figura 3. Esporangio bipapilado y micelio liso; B) Esporangio unipapilado con zoosporas de P. capsici obtenido de suelo infestado en Chapingo, México.
Figura 4. Área bajo la curva del progreso de P. capsici en chile manzano en plantas cultivadas en Chapingo, México, de 2020 a 2021. ddt: días después del trasplante. D: Híbrido ‘Dali’ sin injertar, d: días (frecuencia de aplicación). zLetras iguales indican que no existe diferencias estadísticamente significativas (LSD de Fisher P≤0.05).
Figura 5. Caracterización morfológica de P. capsici en plantas enfermas. A) crecimiento algodonoso, B y C) esporangios bipapilados de P. capsici en chile manzano en Chapingo, México.
PorGermán Ramírez Jiménez, Omar G. Alvarado Gómez, Magdiel Torres de la Cruz*, Miguel Ángel Mayo Hernández, Ángel F. Huamán Pilco, Jorge R. Díaz Valderrama
Recibido: 07/6/2024 – Publicado: 21/2/2025 – DOI: https://doi.org/10.18781/R.MEX.FIT.2406-2
Resumen Antecedentes/Objetivo. El ajo (Allium sativum) es un cultivo de relevancia económica en México. Nuevo León destaca en producción; sin embargo, en el municipio de Aramberri se han reportado pérdidas en postcosecha debido a enfermedades de etiología desconocida. El objetivo de este trabajo fue identificar los hongos asociados al deterioro postcosecha de bulbos de A. sativum en Aramberri, Nuevo León, México y evaluar in vitro su sensibilidad a fungicidas.
Materiales y Métodos. A partir de bulbos con evidencias de deterioro y necrosis se realizó el aislamiento de hongos en medio PDA. Cuatro aislamientos se identificaron mediante análisis morfológico y un aislamiento de cada especie morfológica se identificó mediante análisis molecular. Se evaluó la patogenicidad de los cuatro aislamientos sobre bulbillos libres de síntomas. Además, se realizaron pruebas de sensibilidad in vitro de los aislamientos a fungicidas protectantes y sistémicos. Los fungicidas se evaluaron a tres concentraciones y se estimó la inhibición del crecimiento micelial (CRM) y de la germinación de conidios (GDC).
Resultados. Se identificaron a los hongos Alternaria embellisia y Penicillium allii asociadas a bulbos de A. sativum con deterioro en poscosecha. P. allii mostró capacidad para desarrollar infecciones internas a partir de heridas; A. embellisia sólo mostró crecimiento sobre las heridas. Hubo diferencias significativas (p <0.0001) en la efectividad de los fungicidas sobre las dos especies. El propiconazol y el hidróxido de cobre inhibieron al 100% el CRM y la GEC en ambos hongos, en todas las dosis evaluadas.
Conclusión. Se reporta por primera vez a P. allii como agente causal de pudrición verde del ajo en México. Este estudio servirá de base para elegir estrategias de control y contribuirá significativamente a reducir las pérdidas económicas en la producción de ajo en esta región.
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Cuadro 1. Fungicidas sistémicos y protectantes evaluados sobre Alternaria embellisia y Penicillium allii.
Cuadro 2. Efectividad de fungicidas sistémicos y protectantes sobre el crecimiento micelial y la germinación de esporas de Alternaria embellisia y Penicillium allii in vitro.
Figura 1. A. Bulbos de Allium sativum variedad “Don Fermín” con deterioro en postcosecha. B. Bulbillos de A. sativum con cancros y moho verde.
Figura 2. Alternaria embellisia (syn. Embellisia allii), aislamientos AL1D2B y AL1D3B. A. Colonia de 7 d creciendo en medio PDA a 25 °C. B, C. Conidióforo simple y conidio solitario. D, E. Conidióforo ramificado. F. Conidios septados. G, H. Clamidosporas.
Figura 3. Penicillium allii, aislamientos AL1D4B y AL1D5B. A. Colonia de 7 d creciendo en medio PDA a 25°C. B. Conidióforo mostrando estípite y métula con pared rugosa. C. Conidióforo. D. Conidióforo con fiálides y conidiación formando cadenas. E. Conidios. F, G. Clamidosporas terminales e intercalares.
Figura 4. A. Árbol filogenético de máxima verosimilitud construido a partir de secuencias parciales del espaciador interno transcrito 1 y 2 que intervienen en la subunidad 5.8S rDNA para el aislamiento de Alternaria embellisia (número de acceso Genbank: PP869831), y B. Árbol filogenético de máxima verosimilitud construido a partir de secuencias parciales del gen de β tubulina para el aislamiento de Penicillium allii (número de acceso Genbank: PP920512); obtenidos de muestras de bulbos de ajo con pudrición en postcosecha, en Aramberri, Nuevo León. Los datos de otras cepas y especies de Alternaria se obtuvieron de Pryor y Bigelow (2003). Los datos de otras cepas y especies de Penicillium se obtuvieron de Samson et al. (2004). Los números al lado de los nodos indican los valores del análisis de robustez en porcentaje.
Figura 5. Prueba de patogenicidad de (A) Penicillium allii (AL1D4B) y (B) Alternaria embellisia (AL1D2B) sobre bulbillos de Allium sativum,14 d después de la inoculación. (C) Testigo. Cada bulbillo en una misma columna representa las repeticiones del aislamiento.
PorOscar Guillermo Rebolledo Prudencio, Wilberth Chan Cupul*, Guadalupe Moreno Zúñiga, Carlos Adrián Cruz Jiménez, Juan Carlos Sánchez Rangel
Recibido: 15/11/2024 – Publicado: 21/2/2025 – DOI: https://doi.org/10.18781/R.MEX.FIT.2024-09
Resumen Antecedentes/Objetivo. En Tecomán, Colima, México, se detectó una mancha foliar (MF) con incidencia del 92.0% en Cocos nucifera híbrido “Enano Verde de Brasil” (EVB). El objetivo fue caracterizar morfológica, molecular y bioquímicamente al hongo asociado a la MF en palma de coco EVB y evaluar su susceptibilidad a fungicidas biológicos comerciales.
Materiales y métodos. El aislado se caracterizó morfológica y molecularmente. Se evaluó su crecimiento, esporulación y producción de lacasas en diferentes medios de cultivo. Se determinó la inhibición micelial in vitro y dosis letal media (DL50) de fungicidas biológicos comerciales a base de hongos antagonistas (Trichoderma harzianum y T. viride), bacterias (Bacillus subtilis y B. amyloliquefaciens) y actinobacterias (Streptomyces lydicus y S. jofer).
Resultados. Bipolaris oryzae fue el agente asociado a la MF, produjo 25.54 y 22.17 U mg de proteína-1 de actividad lacasa en los medios Sivakumar y salvado de trigo (ST). El medio ST permitió la mayor esporulación. T. harzianum inhibió al 100% a B. oryzae en las cuatro dosis evaluadas. B. subtilis y B. amyloliquefaciens inhibieron al 100% a B. oryzae en la dosis más alta evaluada (20 mL L-1).
Conclusión. Bipolaris oryzae es el agente asociado a la MF, produjo la mayor actividad lacasa en Sivakumar y ST. La mayor esporulación y crecimiento diario fue en ST. T. harzianum destacó sobre T. viride al inhibir en 100% el crecimiento de B. oryzae. Bacillus subtilis, S. lydicus y B. amyloliquefaciens fueron más efectivas contra B. oryzae comparado con S. jofer.
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Cuadro 1. Secuencias utilizadas para la generación del árbol filogenético de Bipolaris oryzae agente asociado a la mancha foliar de cocotero.
Cuadro 2. Actividad lacasa, tasa de crecimiento diario (TCD) y esporulación de Bipolaris oryzae en medios semisólidos.
Cuadro 3. Inhibición del crecimiento micelial (%) de Bipolaris oryzae por diferentes dosis de fungicidas biológicos comerciales.
Cuadro 4. Dosis letal noventa (DL90) de seis fungicidas biológicos comerciales sobre Bipolaris oryzae.
Figura 1. Hojas con síntomas de mancha foliar en palma de cocotero híbrido “Enano Verde de Brasil”. A) Manchas ovaladas color marrón y halo amarillo, B) hojas con de palma con múltiples manchas ovaladas y C) vista del vivero con plantas con síntomas de mancha foliar.
Figura 2. Características culturales y morfológicas de Bipolaris oryzae. A y B) Conidioforos; C a F) conidiosporas; G) agrupación de conidióforos; H) hifas septadas; I) micelio joven de cinco días de crecimiento en medio; J) micelio maduro de 20 días de crecimiento en medio PDA.
Figura 3. Análisis filogenético con base en el método de máxima verosimilitud utilizando el modelo Kimura de 2 parámetro (G+I). Árbol creado con el logaritmo de probabilidad más alto (-5759.36) de la secuencia del ADNr 28S de las cepas de Bipolaris similares a las del agente asociado a la MF en palma de cocotero EVB (Bipolaris oryzae ACMFCnhEVB_1) usando MEGA11. Es árbol se enraizó utilizando a Fusarium oxysporum se utilizó como grupo externo.
Figura 4. Crecimiento de Bipolaris oryzae a cinco días después de la inoculación en PDA modificado con diferentes dosis de fungicidas biológicos comerciales.
Figura 5. Regresión lineal entre la inhibición (%) del crecimiento de Bipolaris oryzae y las dosis utilizadas de cada fungicida biológico comercial.
PorMaría del Sol Cuellar Espejel, Evangelina Esmeralda Quiñones Aguilar, Gabriel Rincón Enríquez*, Rodolfo Hernández Gutiérrez, Juan Carlos Mateos Díaz, Sergio David Valerio Landa
Recibido: 15/11/2024 – Publicado: 13/2/2025 – DOI: https://doi.org/10.18781/R.MEX.FIT.2024-25
Resumen Antecedentes/Objetivo. Las enfermedades como la peca bacteriana en jitoma te (Solanum lycopersicum) y la mancha bacteriana en chile (Capsicum annuum) causan graves pérdidas económicas globales. Una alternativa sustentable para su control es el uso de inductores proteicos (proteínas Harpin=Hrp) que activan la respuesta de defensa de las plantas al ser reconocidas por el sistema de inmunidad vegetal, induciendo mecanismos de defensa en contra de patógenos. El objetivo de esta investigación fue evaluar la efectividad biológica y la dosis óptima de apli cación del inductor biológico BioFensa (a base de proteínas Hrp), producido en planta piloto para controlar estas enfermedades.
Materiales y Métodos. Se realizaron tres experimentos en invernadero para eva luar la efectividad biológica de Biofensa (1 μg mL-1); para ello se probó el inductor proteico para el control de la mancha bacteriana (X. euvesicatoria cepa BV865 [1] y BV801 [2]), así como para la peca bacteriana (P. syringae pv. tomato, cepa DC3000 [3]). Cada experimento incluyo 5 tratamientos y 11 repeticiones. Además, se realizó un experimento para determinar la dosis óptima de BioFensa (0.01, 0.1 y 1.0 μg mL-1) contra X. euvesicatoria cepa BV801, con 7 tratamientos y 8 repeti ciones [4]. En los cuatro experimentos en total, las plantas fueron asperjadas con BioFensa (3 mL por planta) 24 h antes de la infección y se evaluaron los síntomas después de 30 días contando manchas en el tejido foliar.
Resultados. BioFensa fue efectivo en reducir significativamente el daño en plan tas de chile y tomate (LSD, p≤0.05). A una concentración alta (1 μg mL-1) logró prevenir la aparición de manchas en plantas de jitomate en un 53%, mientras que para plantas de chile contra la cepa BV865 previno en un 60%. Por otro lado, para para plantas de chile contra la cepa BV801, a concentraciones bajas (0.01 y 0.1 μg mL-1), los síntomas se redujeron significativamente entre un 38-41%, mientras que a una concentración más alta (1 μg mL-1) este efecto no se mantuvo, sugiriendo un límite en la percepción de inductores por las plantas.
Conclusión. Los resultados sugieren que BioFensa tiene el potencial de ser una alternativa efectiva para controlar enfermedades en cultivos hortícolas como jito mate y chile.
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Cuadro 1. Composición de los tratamientos del experimento 4 para determinar el efecto de distintas dosis de los inductores proteicos bajo condiciones de invernadero para plantas de chile.
Figura 1. Efectividad biológica de distintos tratamientos biológicos para el control de P. syringae pv. tomato, cepa DC3000 (peca bacteriana) en plantas de jitomate en condiciones de invernadero, según la cantidad de manchas necróticas, cloróticas y totales por planta. PS=Planta sana; PE=Planta enferma; AG=Actigard® (0.003 g mL−1); MG= Messenger Gold® (0.003 g mL−1); BF= BioFensa (1 μg mL−1). Letras distintas dentro de cada variable de repuesta indican dife rencias significativas de acuerdo con la prueba LSD (p≤0.05). Las barras en el rectángulo indican ± el error estándar.
Figura 2. Efectividad biológica de distintos tratamientos biológicos para el control de X. euvesicatoria, cepa BV865 en plantas de chile ancho variedad San Luis en condiciones de invernadero, según la cantidad de manchas necróticas, cloróticas y totales por planta. PS=Planta sana; PE=Planta enferma; AG=Actigard® (0.003 g mL−1); MG= Messenger Gold® (0.003 g mL−1); BF= BioFensa (1 μg mL−1). Letras distintas dentro de cada variable de repuesta indican diferencias significativas de acuerdo con la prueba LSD (p≤0.05). Las barras en el rectángulo indican ± el error estándar.
Figura 3. Efectividad biológica de distintos tratamientos biológicos para el control de X. euvesicatoria, BV801, en plantas de chile ancho variedad San Luis en condiciones de invernadero, según la cantidad de manchas necróticas, cloróticas y totales por planta. PS=Planta sana; PE=Planta enferma; AG=Actigard® (0.003 g mL−1); MG= Messenger Gold® (0.003 g mL−1); BF= BioFensa (1 μg mL−1). Letras distintas dentro de cada variable de repuesta indican diferencias significativas de acuerdo con la prueba LSD (p≤0.05). Las barras en el rectángulo indican ± el error estándar.
Figura 4. Efecto de distintas dosis de BioFensa (0.01, 0.1 y 1 μg mL−1) sobre el control de X. euvesicatoria, cepa BV801 en plantas de chile ancho variedad San Luís en condiciones de invernadero. PS=Planta sana; PE=Planta enferma. Letras distintas indican dentro de cada variable de respuesta diferencias significativas de acuerdo con la prueba LSD (p≤0.05). Las barras en el rectángulo indican ± el error estándar.
PorWilberth Chan Cupul*, Osvaldo Villegas Guerrero, Juan C. Sánchez Rangel, Gilberto Manzo Sánchez, Marco T. Buenrostro Nava
Recibido: 15/11/2024 – Publicado: 13/2/2025 – DOI: https://doi.org/10.18781/R.MEX.FIT.2024-05
Resumen Antecedentes/objetivo. La Sigatoka negra (SN) es una de las principales fitopatologías que reduce la producción de banano en México. Desarrollar productos biológicos a base de antagonistas es una actividad preponderante de estudio. Se evaluó la producción de conidiosporas de Trichoderma spp. en fermentación sólida sobre granos de arroz y maíz, y se estudió el efecto in situ de conidiosporas y Streptomyces sp. en la epidemiologia de la SN en banano cv. Gran enano.
Materiales y métodos. En fermentación sólida se evaluó el rendimiento de cuatro cepas de Trichoderma spp. (T-82, T-85, T-94 y T-99) en arroz entero (AE) y maíz quebrado (MQ); se empleó un diseño factorial A×B (A=cepas y B=sustrato). Las dos cepas con mejor rendimiento (T-99 y T-85) y un producto a base de Streptomyces spp. se aplicaron en campo para evaluar la epidemiología de la SN a través de la severidad, promedio ponderado de infección (PPI) y área bajo la curva del progreso de la enfermedad (ABCPE), a través de un diseño de bloques al azar.
Resultados. El MQ incrementó el rendimiento de Trichoderma spp. en 71%, las cepas T-94 (1.41×108 conidiosporas g-1) y T-85 (1.20×108 conidiosporas g-1) presentaron los mayores rendimientos. La cepa T-85 redujo la severidad, PPI y ABCPE de la SN comparado con las aplicaciones del control químico “Mancozeb”.
Conclusión. El MQ fue el mejor sustrato para obtener mayor rendimiento en las cepas T-94 y T-85 de Trichoderma spp. La aplicación foliar semanal de conidiosporas de Trichoderma T-85 redujo la severidad, PPI y ABCPE de la SN en banano cv. Gran enano.
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Cuadro 1. Rendimiento de cepas de Trichoderma spp. en sustratos sólidos.
Cuadro 2. Severidad de la Sigatoka negra en banano cv. Gran enano a través de aplicaciones de Trichoderma spp.
Cuadro 3. Promedio ponderado de infección (PPI) de la Sigatoka negra en banano cv. Gran enano a través de aplicaciones de
Trichoderma spp.
Trichoderma spp.
Figura 1. Suma general del área bajo la curva del progreso de la enfermedad (ABCPE) de la Sigatoka negra en banano cv. Gran enano a través de las aplicaciones de Trichoderma spp.
Figura 2. Comportamiento del área bajo la curva del progreso de la enfermedad (ABCPE) de la Sigatoka negra en banano cv. Gran enano a través de aplicaciones de Trichoderma spp.
PorJeny Michua Cedillo, Gustavo Mora Aguilera*, Gerardo Acevedo Sánchez
Recibido: 30/7/2024 – Publicado: 31/12/2024 – DOI: https://doi.org/10.18781/R.MEX.FIT.2406-7
Resumen Antecedentes/Objetivo. Miembros de Nectriaceae se han detectado en Michoacán desde 2019. Sin embargo, su detección no ha tenido el enfoque etiológico primario por lo que se desconoce la identidad de especies en raíz, distribución geográfica y asociación con otras familias. El objetivo fue caracterizar biológica y molecularmente especies nectriales asociadas al aguacate (Persea americana).
Materiales y Métodos. Se procesaron 70 muestras compuestas de raíces provenientes de árboles de aguacate con marchitez detectados en huertos comerciales de 13 municipios de Michoacán. Treinta aislados seleccionados con criterios epidemiológicos se cultivaron en extracto malta-agar, PDA y avena-agar para caracterización cultural y morfológica. A partir del ADN micelial se amplificaron los genes TEF 1-a y RPB2, las secuencias se limpiaron y alinearon con Seqassement y MAFFT, respectivamente. Se aplicaron algoritmos filogenéticos de inferencia Bayesiana y máxima parsimonia mediante PAUP4.0 y MrBayes3.2 complementándose con 66 y 65 secuencias del GenBank para TEF 1-a y RPB2, respectivamente. Cuatro especies de Hypocreales y S. chartarum se emplearon como especies externas.
Resultados. Se obtuvieron cinco morfotipos de nectriales con crecimiento radial variable y coloración marrón. Se identificaron tres géneros y tres especies con TEF 1-a (>97% homología) y tres géneros y cinco especies con RPB2 (>97% homología) correspondientes a Ilyonectria (56% de los aislados), Dactylonectria (33 %), Mariannaea (6 %) y Thelonectria (3 %). En raíz, con niveles de daño variable, se observaron asociaciones significativas (p ≤ 0.05) entre especies nectriales con Armillaria (97.1 %), Fusarium (92.9 %), Paecilomyces (56.4 %) y Mortierella (47.3 %), no así con Phytophthora (r < - 0.07). Regionalmente, Ilyonectria liriodendry fue las más prevalente, preponderantemente asociada con Fusarium y/o Armillaria. El sur del municipio de Tacámbaro tuvo la mayor diversidad de especies nectriales y géneros fungosos en general.
Conclusión. Se postula la presencia regional de un síndrome de declinamiento en aguacate asociado a un complejo de hongos caracterizado por defoliación descendente, marchitez, reducción de crecimiento de fruto, decoloración y necrosis medular y cortical en raíz secundaria. Los nectriales Dactylonectria macrodidyma, D. novo-zelandica, Thelonectria lucida, Mariannaea samuelsii y I. liriodendry se asociaron con estos síntomas posiblemente con capacidad primaria de infección, pero frecuentemente en coinfección con Fusarium spp. y/o Armillaria spp. (r = 0.60 – 0.88, p ≤ 0.05). Otros hongos podrían estar asociados. Phytophthora podría tener limitada implicación en este síndrome. Este constituye el primer reporte de Ilyonectria, Dactylonectria, Mariannaea y Thelonectria asociados al aguacate (Persea americana) en México.
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Figura 1. A. Árbol aparentemente sano y corte longitudinal y transversal de raíz de 1.5 cm de diámetro y asociación de Ilyonectria liriodendri; B. Defoliación apical, corte logitudinal y transversal de raíz con necrosis restringida asociados a I. liriodendri; C. Reducción del tamaño de frutos, corte longitudinal y transversal de raíz con necrosis invasiva asociada a I. liriodendri; D. Defoliación y hoja pequeña asociada a Armillaria + I. liriodendri y raíz con necrosis medular; E. marchitez moderada asociada a Phytophthora cinnamomi + I. liriodendri y corte longitudinal de raíz con necrosis restringida; F. Follaje amarillo, hoja pequeña y reducción de copa asociado a Fusarium spp + Dactylonectria macrodidyma y raíz con necrosis medular invasiva. G. Marchitez progresiva y raíz con necrosis y micelio invasivo en raíz de raíz asociado a Armillaria sp.; H. Marchitez, amarillamiento de follaje y raíz con necrosis subcortical asociada a Phytophthora cinnamomi; I. Marchitez general, follaje necrótico adherido a ramas, raíz con líneas de necrosis en raíz vascular asociado a Verticillium sp.
Figura 2. Escala nominal de seis clases de vigor y daño raíces secundarias de aguacate asociados a cuatro géneros y cinco especies de nectriales: 0. Árbol sano con 100% de vigor y raíz sin lesiones; 1. Defoliación apical en ramas superiores, raíz con lesiones rojizas <1 cm en raíz central (80% vigor en copa); 2. Defoliación apical progresiva en ramas superiores, amarillamiento en estrato foliar inferior, raíz con líneas rojizas en parénquima medular (75% vigor); 3. Defoliación, marchitez y raíz con necrosis invasiva en raíz subcortical y medular (50% vigor); 4. Defoliación parcial, hojas pequeñas y raíz con necrosis en xilema y floema primario y secundario raíz (35% vigor); y 5. Árbol defoliado y raíz con necrosis invasiva (15% vigor).
Figura 3. Morfotipos culturales de nectriales aislados de raíces de aguacate con síntomas en dosel y raíces según descripción en Figura 2 e identificados molecularmente con homologías > 97% para la region/gen RPB2 y TEF 1-α. A-D. Dactylonectria macrodidyma; E-H. Dactylonectria novozelandica; I-L. Ilyonectria liriodendri; M-P. Mariannaea samuelsii; y Q-T. Thelonectria lucida.
Figura 4. Morfotipos culturales en EMA al 2% (A, B) y PDA (C, D) aislados de raíces de aguacate con síntomas putativos a nectriales. A. Armillaria sp; B. Armillaria gallica; C. Phytophthora cinnamomi; y D. Fusarium sp.
Figura 5. Árbol filogenético generado por análisis de Inferencia bayesiana de secuencias de la región RPB2 generados a partir de aislados de nectriales de árboles de aguacate comercial. Los aislados provenientes de este trabajo están indicadas con el prefijo MICH. El análisis incluyó ocho especies de referencia externa (ramas superiores y Cylindrocarpon). La barra de escala representa el número esperado de cambios de nucleótidos por sitio.
Figura 6. Árbol filogenético generado por análisis de inferencia bayesiana de secuencias del gen TEF 1-α generados a partir de aislados de nectriales de árboles de aguacate comercial. Los aislados provenientes de este trabajo están indicadas con el prefijo MICH. El análisis incluyó seis especies de referencia externa. La barra de escala representa el número esperado de cambios de nucleótidos por sitio.
Figura 7. Distribución y prevalencia regional de comunidades en raíz de organismos putativamente asociados con el decaimiento y síndrome de marchitez del aguacate en 13 municipios de Michoacán. A. Distribución filogeográfica de cuatro géneros nectriales. B. Distribución filogeográfica de seis especies nectriales. Se incluyen Armillaria spp. y Fusarium spp. como especies de alta prevalencia regional (fines comparativos). Las zonas verde-amarillo-marrón en ambos mapas muestra la proyección geoestadística de intensidad epidémica (escala de color: baja, moderada y alta) evaluada mediante escala de severidad de daño en dosel de árbol. El punteado color azul verdoso representa polígonos del inventario de huertas de aguacate.
Figura 8. Gráficas de asociatividad de organismos aislados de raíces de aguacate con síntomas de síndrome de declinamiento. A. Correlación de Pearson (r) que muestra asociación entre nectriales y otros organismos de raíz; y B. Cross correlación en pares y ordenada por nivel de asociatividad para las 25 principales correlaciones significativas.
Cuadro 1. Origen de aislados de nectriales asociados a árboles de aguacate seleccionados para extracción de ADN y PCR amplificación con TEF 1-α y RPB2.
Cuadro 2. Características fisicoquímicas de algunos huertos de aguacate muestreados y especies de nectriales identificados.
PorGabriela Olivares Rodriguez, Juan Gabriel Angeles Núñez, Francisco Mondragón Rojas, Patricia Rivas Valencia, José Luis Zárate Castrejón, Luis Antonio Mariscal Amaro, Luis Febronio Díaz Espino, Talina Olivia Martínez Martínez*
Recibido: 10/7/2024 – Publicado: 31/12/2024 – DOI: https://doi.org/10.18781/R.MEX.FIT.2024-28
Resumen Antecedentes/Objetivo. El hongo Neopestalotiopsis sp. es un patógeno emergente que puede ocasionar pérdidas superiores al 70 % en el cultivo de fresa. Debido a esta situación, se busca implementar métodos de control de bajo impacto ecológico. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto inhibitorio de cepas de Trichoderma sp. y de fungicidas empleados en el Bajío de Guanajuato, México, sobre el crecimiento de Neopestalotiopsis sp.
Materiales y Métodos. El patógeno se aisló de plantas de fresa sintomáticas. Se realizó la caracterización morfológica y de patogenicidad del aislado. Las cepas de Trichoderma se obtuvieron de la colección biológica del Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias Campo Experimental Bajío (CEBAJ) y se confrontaron en cultivos duales con el patógeno, se determinó el porcentaje de inhibición del crecimiento radial (PICR) a las 120 h. Además, se evaluó el efecto de cinco fungicidas comerciales, que se agregaron al medio de crecimiento, sobre el diámetro de crecimiento del hongo.
Resultados. Se obtuvo PICR en un intervalo de 63 al 70 %. El mecanismo de parasitismo de Trichoderma fue por enrollamiento, adhesión y lisis a las hifas del patógeno. La cepa T1 fue la que presentó mayor potencial para el control del patógeno, seguido de T5 y T7. Tres fungicidas comerciales, Tebuconazol (100 mL 100 L-1), Extracto de Canela y Neem (500 mL 100 L-1), y el Ácido Peracético (25 mL 100 L-1) inhibieron completamente el crecimiento del hongo.
Conclusión. Estos resultados contribuyen al conocimiento sobre el control de Neopestalotiopsis sp. con la aplicación de Trichoderma y los productos autorizados en México.
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Figura 1. Síntomas en plantas de fresa infectadas por Neopestaloptiosis sp. A) Achaparramiento de plantas, B) Tizón en hojas, C y D) Deformación en frutos maduros e inmaduros.
Figura 2. Crecimiento de Neopestalotiopsis sp. en medio PDA después de dos semanas de la inoculación. A) Desarrollo de colonias en medio de cultivo con acérvulos negros, B y C) Conidios del hongo.
Figura 3. Síntomas en plantas de fresa causadas por Neopestalotiopsis sp. A) Tizón en hojas, B) Necrosis en tallo y C) Necrosis en cuello y raíz.
Figura 4. Porcentaje de Inhibición de Crecimiento Radial de Neopestalotiopsis sp. obtenidos por confrontación con cepas de Trichoderma (p≤0.05).
Figura 5. Confrontaciones de cepas de Trichoderma contra Neopestalotiopsis sp. Donde T = Trichoderma y P = patógeno. El número que se encuentra en la parte superior derecha corresponde a la identificación de la cepa de Trichoderma. Se observa que T1, T5 y T7 mantiene un nivel de antagonismo de II, mientras que T4, T8 y T10 un nivel III.
Figura 6. Mecanismos de parasitismo de Trichoderma sp frente a Neopestaloptiopsis sp. A) Enrollamiento, B) Formación de ganchos y C) Adhesión y lisis.
Figura 7. Crecimiento de Neopestalotiopsis sp en medio PDA con fungicidas comerciales. Test: testigo sin producto; A-C: Captán 200, 300 y 400 g 100 L-1; D-F: Tebuconazol 100, 250 y 375 mL 100 L-1; G-I: Carbendazim 400, 500 y 600 mL 100 L-1; J-L: Extracto de Canela y Neem 500, 1000 y 1500 mL 100 L-1; M-O: Ácido Peracético 25, 50 y 75 mL 100 L-1; P-R: Fungicida orgánico a base de cítricos 500, 750 y 1000 mL 100 L-1. 400 g y 600 mL 100 L-1 (p≤0.05).
Cuadro 1. Datos de identificación, sustrato de aislamiento y procedencia de cepas de Trichoderma sp. empleadas en el control biológico de Neopestalotiopsis sp.
Cuadro 2. Fungicidas evaluados en la inhibición del crecimiento de Neopestalotiopsis sp.
Cuadro 3. Nivel de antagonismo según Bell et al. (1982) y mecanismos de micoparasitismo.
PorAna Patricia Ibarra Valenzuela, Rosalba Troncoso Rojas, Alma Rosa Islas Rubio, Elizabeth Peralta, Herlinda Soto Valdez*, Hayati Samsudin
Recibido: 09/4/2024 – Publicado: 31/12/2024 – DOI: https://doi.org/10.18781/R.MEX.FIT.2404-4
Resumen Antecedentes/Objetivo. Las tortillas de maíz, alimento básico en México, presentan una vida útil de 1-2 días a 25 °C debido al crecimiento fúngico. Una alternativa para extender la vida de anaquel de las tortillas es adicionar aceite esencial de clavo (AEC), sus componentes mayoritarios: eugenol (E), isoeugenol (I) y acetato de eugenilo (AE). El objetivo fue evaluar el efecto antifúngico del AEC sobre hongos identificados en tortillas de maíz.
Materiales y Métodos. Se adquirieron muestras de un kg de tortillas de maíz de las capitales de cinco estados del país (Sonora, Nuevo León, Michoacán, Oaxaca y Yucatán). Los hongos se identificaron por su morfología y por biología molecular. Además, se les determinó la concentración mínima inhibitoria (CMI) frente a AEC. El efecto de E, I y AE sobre Aspergillus niger (previamente identificado) se evaluó con el modelo de Gompertz.
Resultados. Se obtuvieron dos aislados fúngicos de las tortillas de Nuevo León, Sonora, Yucatán y Michoacán y un aislado de Oaxaca, mismos que se identificaron por biología molecular: Aspergillus longivesica y Curvularia spicifera de Nuevo León; Aspergillus niger y Penicillium brevicompactum de Sonora; Aspergillus sp. de Oaxaca; Mucor sp. y Aspergillus flavus de Yucatán; Penicillium herquei, y Curvularia racemosus de Michoacán. Las CMIs fueron 200, 400, 800, 400, 800, 400, 800, 800 y 400 µg mL-1, respectivamente. AEC, E e I a 800 µg mL-1 retardaron la fase exponencial de crecimiento de Aspergillus niger, mientras que AE no mostró efecto.
Conclusión. El AEC podría ser una alternativa natural para prolongar la vida útil de tortillas de maíz.
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Figura 1. Estructura fúngica por microscopía óptica (40X), aisladas de las tortillas de maíz de Morelia, Mich (A: Penicillium sp. y F: Mucor sp.), Monterrey, N.L. (B: Aspergillus sp. y G: Curvu laria sp.), Oaxaca, Oax (C: Aspergillus sp.), de Hermosillo, Son (D: Penicillium sp. y H: Aspergillus sp.) y Mérida, Yuc (E: Aspergillus sp. y I: Mucor sp.).
Figura 2. Crecimiento de hongos en PDA aisladas de las tortillas de maíz de Morelia, Mich (A, Penicillium sp. y F, Mucor sp.), de Monterrey, N.L. (B, Aspergillus sp. y G, Curvularia sp.), de Oaxaca, Oax (C, Aspergillus sp.), de Hermosillo, Son (D, Penicillium sp. y H, Aspergillus sp.) y de Mérida, Yuc (E, Aspergillus sp. y I, Mucor sp.).
Figura 3. Efecto antifúngico de AEC, E e I sobre el crecimiento de Aspergillus niger en PDA a las 96 h de incubación a 25 ± 1 °C.
Figura 4. Cinética del crecimiento micelial de Aspergillus niger en PDA durante 96 h de incubación a 25 ± 1 °C. yVal=valores de y; Fit 1=curva con datos ajustados.
Cuadro 1. Concentración mínima inhibitoria (CMI) de aceite esencial de clavo sobre hongos (250 conidias) aislados de tortillas de maíz.
Cuadro 2. Parámetros cinéticos del efecto del aceite esencial de clavo (AEC), eugenol (E) e isoeugenol (I) sobre el crecimiento micelial de Aspergillus niger incubado a 25 ± 1 °C durante 96 h, obtenidos con DMFit 3.5 de Excel.
PorAugusto Gil Ceballos Ceballos, Yisa María Ochoa Fuentes*, Ernesto Cerna Chávez, Arely Cano García
Recibido: 18/4/2024 – Publicado: 31/12/2024 – DOI: https://doi.org/10.18781/R.MEX.FIT.2404-5
Resumen Antecedentes/Objetivo. Los extractos de semillas de Canavalia ensiformis han demostrado efectos antiparasitarios y repelentes contra plagas. El objetivo fue evaluar la efectividad del extracto combinado con nanopartículas (NP's) de dióxido de silicio contra los huevos de Meloidogyne incognita.
Materiales y Métodos. Se llevaron a cabo experimentos in vitro para evaluar los efectos de los extractos de semillas de C. ensiformis, tanto por sí solos como combinados con NP's de dióxido de silicio, en la eclosión de juveniles de M. incognita. Se utilizaron 150 huevos y se aplicaron concentraciones de 0, 2, 4, 6, 8 y 10 % del extracto. Además, se evaluaron concentraciones del extracto al 0, 1.5, 2.0, 2.5 y 3.0 %, cada una combinada con concentraciones de NP's al 0.06, 0.08, 0.10, 0.12 y 0.14 %.
Resultados. Ninguno de los tratamientos logró evitar la eclosión más del 30 % de juveniles. La modificación de la técnica de obtención del extracto de semillas de C. ensiformis puede causar un efecto ovicida complementario; sin embargo, al aumentar las concentraciones del extracto, puede propiciar la proliferación de hongos saprofitos y otros microorganismos.
Conclusión. Los tratamientos no mostraron efectos ovicidas significativos arriba del 40 %.
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Figura 1. A: huevo correspondiente al testigo sin inoculación y fijado con azul de algodón (100). B: huevo inoculado con extracto de Canavalia ensiformis y NP´s (100X). C: imagen amplificada de huevo inoculado con C. ensiformis y NP´s (100X). D: huevo inoculado con extracto de C. ensiformis (100X).
Cuadro 1. Comparación de medias del efecto de los tratamientos del extracto de semillas de Canavalia ensiformis y NP´s de dióxido de silicio en huevos de Meloidogyne incognita.
